目錄

精編分子生物學實驗指南 （上下2冊） (第五版)

作 者：[美]F.M.奧斯伯，[美]R.布倫特，[美]R.E.金斯頓等主編；

金由辛，包慧中，趙麗雲等譯校

ISBN：9787030203366

頁數：1391

出版社：科學出版社

出版時間：2017-03-01

版次：1

開本：16

裝幀：平裝

內容簡介

《生命科學實驗指南系列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）》是知名度很高、不斷更新的《Current Protocols in Molecular Biology》系列的精編版本。新版本對原有內容進行了修訂和更新，包括：大腸桿菌、質粒和噬菌體，DNA的製備和分析，DNA和RNA的酶學操作，RNA的製備和分析，重組DNA文庫的構建，重組DNA文庫的篩選，DNA序列測定，克隆化DNA的誘□，DNA導入哺乳動物細胞，蛋白質分析，免疫學， DNA-白質相互作用，釀酒酵母，原位雜交和免疫組織化學，聚合酶鏈反應，蛋白質的表達，蛋白質磷酸化的分析，生物信息學，蛋白質相互作用的分析等；又新增了染色質的裝配與分析，核酸陣列，組合文庫的建立和使用，單個細胞或一群細胞間差異表達基因的發現和分析四章內容。

《生命科學實驗指南系列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）》可供高等院校和科研機構從事分子生物學研究的科研工作者和研究生參考。

前言序言

分子生物學已經發展成熟，並且實驗研究已經進展到如此狀態——以前特殊的實驗程序，現在已成為常規操作——因此，《精編分子生物學實驗指南》（Short Protocols in Molecular Biology，以下簡稱《精編》）的範圍和概念也在不斷改變□。某些內容一度被認為對一般的讀者顯得過於複雜，如組合化學或染色質裝配和分析，現在已被有規律地應用。基於這樣的思考，我們增加了新的章節，並擴展了《精編》原有主題下的內容。

與前面的版本一樣，兩卷本的《精編分子生物學實驗指南》第五版是已出版的《□□分子生物學實驗方法彙編》（Current Protocols in Molecular Biology，以下簡稱《彙編》）一書中的實驗方法的簡寫版本。它由《彙編》的核心手冊和每季更新的服務手冊中提煉而來，涵蓋了《彙編》中所有基本方法及其詳細實驗步驟。本書擬作為實驗室手冊使用，對像是那些熟悉《彙編》中各種詳細解釋的研究生和博士後人員，然而，在本書中對實驗方法有詳細的步驟說明，有經驗的研究人員也可將本書作為獨立的實驗室操作指南。

雖然熟練本書中的技術方法可使讀者進行分子生物學和相關學科研究，但本書並不適用於替代研究生水平的分子生物學教材或作為這一領域的綜合性讀本。另外，我們推薦讀者在使用本書時要對照參考《彙編》中的評論和詳細註釋。最後，我們極力要求讀者透過在分子生物學實驗室中的工作獲得關於基本技術和實驗室安全操作規程的第一手經驗。

如何使用這本書

結構

本書按章編排，每種實驗方案均可從各節中取得。每一節中列出材料、實驗方案的步驟和每種技術的參考文獻。在附錄5中囊括了整本書全部的參考文獻。本書的排列和結構與《彙編》基本一致。儘管各節的編號可能不完全相對應，但各節的標題在兩個版本中是相同的。因此，擁有兩種版本的使用者當需要更詳細的解釋時會發現對照參考《彙編》十分容易和便利。

在整本書中，許多試劑和實驗程序被反覆應用，不過我們並不是反覆複製這些訊息，而是在章節之間廣泛地進行對照參考。書中前面各章（和附錄3）主要介紹常用的技術方法，如基本微生物學和酵素、DNA、RNA的基本操作方法，而後面的各章介紹的是更先進的技術方法。因此，在一個方案中無論何時使用到某一特定的酶，均可對照參考第3章中適當的節，找到介紹該酶反應條件的內容（如3.5介紹逆轉錄酶）。同樣，在整本書中讀者可參考1.3鋪平板或在平板上劃線；參考2.1進行酚抽提和乙醇沉澱；參考2.6進行瓊脂糖凝膠電泳等。因此，在本書的後面章節所介紹的方案中就省略了製備、純化和分析樣品或目的分子的輔助程序。

附錄提供了試劑和溶液的配方（附錄1），有用的測量值和數據（附錄2），常用的生物化學實驗技術（附錄3），供應商的名稱和地址（附錄4）。

方案

許多節中都含有幾組方案。在每個節中首先出現的是基本方案，它一般也是□□的實驗方法。備擇方案在下列情況使用：①使用不同的儀器或試劑可得到類似的結果；②起始材料需要方法有所改變□；③對最終產物的要求與基本方案不同。輔助方案介紹了基本方案和備擇方案所需的附加步驟。這些步驟之所以從核心方案中單列出來，是因為它們可能在本書中具有其他用途，或操作時與基本方案各步驟在時間上可以分開。

試劑與溶液

實驗步驟開始之前，材料欄中列出了一個方案中所需的各種試劑。除培養基和限制性內切核酸酶反應緩衝液配方外，相應的配方都在附錄1中列出，並在括號中列出了這些配方的來源。尤其要注意這些特殊溶液中有些溶液的名稱在一個節與另一個節中可能是相似的（如雜交液、裂解緩衝液等），但配方卻不同；因此，在按適當的配方配製試劑時要仔細確認。為了避免混淆，在附錄1中緊接每個試劑名稱的括號內列出了使用每個配方的節序數，但常用緩衝液和溶液除外，如TE緩衝液、PBS。

【註】本書中實驗方案中所使用的，以及所有試劑和溶液製備所使用的水，均應為去離子蒸餾水。儀器

現代分子生物學實驗室中標準儀器及相關用品在本文後列出，並在本書中廣泛採用。在每個方案之前的材料欄中僅包括「特殊」儀器，即在實驗室不易備有的或需要特殊製備的儀器。